Использование реакции гибридизации между молекулами геномной вРНК и пулом кРНК, выделенных из зараженных клеток, в сочетании с методом олигонуклеотидного картирования продуктов реакции позволило провести анализ транскриптов и обнаружить в их составе 2 класса молекул кРНК [Skehel J., Hay A., 1978; Hay A., Skehel J., 1979]. Первый класс кРНК содержит на одном конце молекулы последовательности из…
Анализ закономерностей формирования вирионных белков позволил условно разделить этот процесс на 2 этапа, совпадающих с начальными и поздними стадиями репродукции вируса гриппа. Установлена корреляция между накоплением в зараженной клетке молекул икРНК и синтезом соответствующих им вирусспецифических полипептидов [Inglis S. et al., 1977; Barry R., Mahy В., 1979]. В результате первичной транскрипции сегментов генома все 8…
Следующим, завершающим этапом репродукции, является сборка вирусной частицы и освобождение новой популяции вирионов из зараженной клетки. Процесс формирования зрелых вирионов носит следующий характер. Синтезированные, функционально активные вирионные полипептиды НА+ и NA+ транспортируются к наружной плазматической мембране и на определенном участке внедряются в ее структуру, вытесняя клеточные полипептиды [Харитоненков И. Т., 1980; Lubeck M. et al.,…
Популяция вируса гриппа характеризуется гетерогенностью формы и размеров вирионов. У большинства вирионов форма близка к сферической, со средним диаметром 80 — 120 нм. Длина нитевидных вирионов, характерных для свежевыделенных эпидемических штаммов, превышает в несколько раз размеры сферических частиц [Wrigley N. G., 1979]. После 2 — 3 пассажей вируса через куриные эмбрионы в популяции преобладают вирионы…
В жидком состоянии, т. е. в виде 10 % суспензии мышиных легких или аллантоисной жидкости зараженных куриных эмбрионов, вирусы гриппа теряют активность после прогревания при 56 — 60 °С в течение 30 мин и погибают через 4 мин при 65 °С. При температуре +4°С активность сохраняется на протяжении 2 — 3 мес, в термостате —…
Наблюдения F.Burnet и P. Lind (1951) впервые показали высокую частоту генетических рекомбинаций при сочетанной инфекции, вызванной двумя антигеннородственными вирусами гриппа А или В. Это привело к предположению о возможности сегментарного строения генома вируса гриппа и самостоятельной репродукции в чувствительной клетке индивидуальных генов вирусной РНК с их перегруппировкой в процессе скрещивания двух и более штаммов вируса…
Культивирование вирусов гриппа в условиях лаборатории на протяжении почти 50-летней истории их изучения прошло 3 этапа. Первый из них связан с выделением вируса от больных людей путем заражения хорьков. Последующее титрование вируса в легких зараженных хорьков, изучение антигенной структуры вирусов гриппа и особенностей формирующегося противогриппозного иммунитета проводили с помощью интраназального заражения белых мышей. Возможность выделения…
Сохранившуюся трансляционную активность тестируют далее в системе бесклеточного синтеза белка, а выявляемые продукты трансляции анализируют по данным электрофореза в ПААГ или двумерной хроматографией триптических пептидов. Другой подход состоял в использовании непосредственного сравнительного анализа электрофоретической подвижности полипептидов и сегментов РНК родительских и рекомбинантных штаммов вируса гриппа, которая определяется величинами молекулярной массы и заряда этих макромолекул. В…
Третий этап в истории культивирования вирусов гриппа в лабораторных условиях начался в 50-х годах и связан с применением клеточных и тканевых культур. Известно, что вирусы гриппа серотипа А инфицируют и вызывают заболевания не только у человека, но и у многих видов млекопитающих, домашних и диких птиц. Несмотря на столь широкое распространение и значительный круг хозяев…
Как было упомянуто выше, геном вируса гриппа А содержит информацию для синтеза 8 вирионных и 2 неструктурных белков. В порядке убывающих значений молекулярной массы (от 110 000 до 11000 дальтон) эти полипептиды располагаются следующим образом: PI, P2, РЗ, НА, NA, NP, M (Ml, M2), NS1, NS2 [Четверикова Л. К., Смородинцев А. А., 1982]. Белки полимеразного…
