Метод одиночной радиальной иммунодиффузии (ОРИД)

Метод основан на способности антител формировать опалесцирующие зоны в геле, куда заранее внесены антигены вируса гриппа. Диффундирующей субстанцией являются антитела, тогда как антиген фиксирован в геле, в форме интактных вирусных частиц [Schild G. et al., 1972]. ОРИД выполняется на специальных герметизированных пластиковых предметных стеклах, покрытых агарозным или агаровым гелем, содержащим очищенные вирусные частицы в таком количестве, чтобы конечная концентрация составляла 0,1 мг вирусного белка в 1 мл геля [Chakraverty P. et al., 1973].

На поверхности геля делают несколько десятков мелких круглых отверстий для внесения сывороток. Содержание антител к гемагглютинину и нейраминидазе определяется через 14 — 18 ч по величине и форме опалесцирующей зоны, различающейся для каждого из этих антигенов. С

уществует тесная зависимость между диаметром зоны опалесценции и титром антигемагглютинирующих и антинейраминидазных антител, совпадающая с результатами постановки РТГА, РН и РИНА. Получены сопоставимые данные при исследовании сывороток больных гриппом людей в реакциях ОРИД, РТГА и РСК. Метод ОРИД оказался простым в выполнении, чувствительным и специфичным, требовал ничтожных объемов сыворотки (0,003 мл), позволяя одновременно определять наличие и уровень антител к гемагглютинину и нейраминидазе вируса группа при изучении иммунологической структуры населения [Chakraverty P. et al., 1973].

Несколько уступая по чувствительности РТГА, ОРИД обладает рядом существенных преимуществ:

• возможностью использования цельных сывороток в весьма небольших количествах без предварительного устранения в них неспецифических ингибиторов;
• длительным (в течение нескольких месяцев) сохранением активности тест-пластинок;
• удобством использования тест-пластинок в полевых условиях;
• сохранением зоны опалесценции в течение нескольких недель, что дает возможность пересылать пластины на значительные расстояния;
• корреляцией полученных данных с результатами других серологических реакций.

Широкое применение этого метода в практических лабораториях требует, однако, как и для реакции ДИД, использования высококонцентрированного очищенного антигена и централизованного приготовления стандартных диагностических стекол с антигеном, внесенным в гель.

«Грипп и его профилактика», А.А. Смородинцев