Главная / Профилактика гриппа / Этиология гриппа / Изучение антигенной структуры вируса гриппа с помощью моноклональных антител

Изучение антигенной структуры вируса гриппа с помощью моноклональных антител


26 февраля 2009

Главным показателем качества иммунной сыворотки является ее высокая специфичность, т. е. наличие в ней только одного типа антител против определенной детерминанты. Повышение специфичности сывороток достигается путем иммунизации животных высокоочищенными антигенами, истощением сывороток родственными многокомпонентными антигенами, в которых заведомо отсутствуют интересующие исследователя антигенные детерминанты, или путем выделения из иммунных сывороток отдельных классов иммуноглобулинов (IgG, IgA, IgM, IgE, IgD). Однако все эти приемы не обеспечивали получения высокоспецифичных моноклональных антител, представленных идентичными молекулами, биосинтез которых осуществляется индивидуально взятым клоном лимфоцитов В.

Антитела, получавшиеся в результате использования перечисленных методов, представляли собой весьма сложный по составу комплекс «поликлональных» антител, не идентичных между собой и являющихся продуктом биосинтеза многих клонов В-лимфоцитов. Принципиальная основа оригинального метода получения моноклональных антител была разработана в 1975 г. G. Кб1л-ler, С. Milstein (1975). Эти авторы получили популяцию клеток, так называемых гибридом, путем слияния клеток миеломы мышей с лимфоцитами из селезенок иммунизированных животных. Слияние двух чужеродных клеток осуществляли с помощью полиэтиленгликоля, растворяющего их мембраны. Гибридома сохраняла способность лимфоцитов продуцировать антитела и приобретала свойство миелоидных клеток к неограниченному размножению.

Клонирование гибридной популяции позволило выделить клоны клеток, продуцирующих антитела к отдельным детерминантам того или иного антигена, с последующим накоплением нужных клонов в неограниченном количестве in vitro в искусственных питательных средах. Такой способ получения антител обеспечил возможность накопления большого количества клеток одного клона, продуцирующего антитела с заданной высокой специфичностью. Более детальная информация о методе получения моноклональных антител содержится в специальных обзорах G. Kohler, С. Milstein (1975), W. Gerhard и соавт. (1975), I. Goding (1980), М. Scharff и соавт. (1981). Применение моноклональных антител открыло большие возможности для изучения отдельных детерминант вирусов гриппа [Gerhard W., 1976]. Особенно подробно были проанализированы детерминанты гемагглютинина вируса A/PR/8/34.

В каждом случае сравнивали в РТГА диапазон реактивности сыворотки к исходному вирусу и различных препаратов моноклональных антител, полученных к отдельным детерминантам этого же вируса. Было показано, что гемагглютинин штамма A/PR/8/34 содержит не менее 8 различных детерминант. Полученные к ним моноклональные антитела по-разному реагировали с различными вирусами гриппа A(H0N1) и A(H1N1). Таким образом, диапазон реактивности моноклональных антител отражал уровень специфичности детерминант, к которым они были получены. Одна из детерминант оказалась общей не только для разных вирусов гриппа A(H0N1), но и для A(H1N1). В противоположность ей, существовала штаммоспецифическая детерминанта, свойственная только вирусу PR/8/34. Остальные 6 детерминант гемагглютинина были частично общими, и полученные к ним антитела по-разному взаимодействовали с изученными вирусами гриппа A(H0N1).

«Грипп и его профилактика», А.А. Смородинцев

Комментарии закрыты.

Top

Vitaminov.net