Использование гибридных клеток
Использование большого числа гибридных линий хомяк — человек позволило установить, что в дополнение к хромосоме № 5 синтез ИФН связан в значительной мере и с наличием или отсутствием хромосомы № 2. Только клетки, содержавшие обе хромосомы, давали максимальную продукцию ИФН. Было установлено, что хромосома № 2 усиливает продукцию ИФН. Без хромосомы № 2 клеточная линия продуцирует уменьшенные количества ИФН, а без хромосомы № 5 она вообще не продуцирует ИФН после стимуляции.
Эти исследования были продолжены на моделях различных человеческих фибробластоидных клеточных линий, имевших диплоидный, трисомный или больший набор хромосом. Сравни тельное изучение нескольких линий фибробластоидных клеток с диплоидным набором хромосом и обязательным присутствием хромосомы № 5 показало, что они продуцировали сопоставимое количество человеческого ИФН. Напротив, клеточные линии, содержавшие 3 или 4 копии длинного плеча хромосомы. № 5, продуцировали в 134 раза больше ИФН, чем остальные диплоидные культуры. Это привело к выводу о том, что именно длинное плечо хромосомы № 5 регулирует продукцию ИФН клетками человека.
Несколько линий клеток КБ, которые содержали до 10 копий короткого плеча хромосомы № 5, но лишь 2 длинных плеча, продуцировали обычное для диплоидных культур количество ИФН. Это также свидетельствовало о том, что короткое плечо хромосомы № 5 не играет роли в продукции ИФН, которая связана только с длинным плечом хромосомы № 5.
Все исследования, стремившиеся доказать связь продукции ИФН с другими хромосомами клеток человека, потерпели не удачу, Более того, изучение набора клеточных культур с раз личными соотношениями длинного и короткого плеча у хромо сомы № 5 позволило прийти к выводу, что чем большим было соотношение длинного плеча к короткому, тем большей продукцией ИФН обладала данная клеточная линия. Коме того, уда лось установить, что в коротком плече хромосомы № 5 содержится репрессор продукции ИФН, поскольку с уменьшением указанного соотношения происходило усиление ингибиции продукции ИФН.
Продукция ИФН осуществляется аналогично синтезу любых других клеточных белков. Вначале в ядрах клетки формируются и выходят в цитоплазму иРНК с образованием полисомных комплексов, на которых осуществляется процесс трансляции с синтезом белковых молекул ИФН [Ершов Ф. И., Аскарходжаев Н. А., 1980].
Вскоре после начала синтеза ИФН в ДНК зараженной клетки начинается синтез еще одной иРНК, которая транслируется затем в молекулы регулирующего белка (РБ), являющегося продуктом жизнедеятельности клетки и который недавно уда лось выделить в чистом виде и сконцентрировать в 1000 раз [Fleischmann W. et al., 1979].
РБ либо вступает в непосредственный контакт с ИФН и РНК, либо каким-то иным способом воздействует на ее образование и проявление функциональной активности, предупреждая этим дальнейший синтез избыточных количеств ИФН в клетке.
В результате процесс формирования ИФН замедляется, а затем полностью блокируется. ИФН синтезируется в течение — 1,5 ч, т. е. быстрее, чем появляется вирусное потомство. Заметно опережая синтез вируса, зараженная клетка успевает осуществить за указанный срок формирование многих тысяч молекул ИФН. Покидая клетку до завершения сборки вирусного потомства, ИФН вступает в немедленный контакт с большим числом еще здоровых клеток, стимулируя их резистентность к возможному заражению.
Период активации системы ИФН колеблется при острых вирусных инфекциях различной этиологии от нескольких дней до 3 — 4 нед, что определяется продолжительностью репродукции вирусов при разных заболеваниях.
По нашим данным, вирус гриппа активирует систему ИФН у людей в течение 5 — 7 дней, вирус паротита — 10 — 14 дней, а вирусы полиомиелита и другие энтеровирусы — 3 — 4 нед. Завершением синтеза молекул ИФН оканчивается первая половина функционирования системы ИФН.
«Грипп и его профилактика», А.А. Смородинцев
