Грипп и группа острых респираторных заболеваний негриппозной этиологии (ОРЗ) объединяют большое число этиологически и клинически разнородных инфекций, отличающихся широким и повсеместным распространением. Дифференцирование многочисленных возбудителей респираторных инфекций, в том числе и гриппа, возможно только с помощью современных методов лабораторной диагностики (вирусологической, серологической, иммунофлюоресцентной).
«Грипп и его профилактика», А.А. Смородинцев
Другие методы диагностики («макрометод»). Из других методов следует указать на разработку реакций, основанных на агглютинации эритроцитов, нагруженных иммуноглобулинами к соответствующим вирусам. В основе метода, условно названного «макрометод» [Корнеева Э. П. и др., 1976, 1979], лежит принцип непрямого иммунологического анализа, предусматривающий взаимодействие вируса в исследуемом смыве со специфическими противовирусными антителами, фиксированными, на эритроцитах. «Тест-препарат» представляет собой…
РИА относится к группе так называемых методов связывания (bindings assays), основанных на формировании комплекса между антигеном и антителом, и обеспечивает возможность определения ничтожного количества различных веществ (вирусы, микроорганизмы, антитела, различные белки, лекарственные препараты, гормоны, ферменты). Принципиальная основа метода, отмеченного Нобелевской премией в 1977 г., была разработана R. Yalow и S. Berson (1960) для количественного определения…
Для определения антигена в исследуемом материале используют также обратный метод РИА. В этом случае исследуемый антиген соединяют с известными мечеными антителами и инкубируют для формирования иммунного комплекса. Параллельно известный антиген, гомологичный меченым антителам, фиксируют на твердом носителе, куда добавляют затем смесь исследуемого антигена с мечеными антителами. В случае формирования иммунного комплекса между исследуемым вирусом и…
Применяется в инфекционной иммунологии в течение 30 лет, однако возможность его использования для диагностики гриппа показана сравнительно недавно [Schild G. et al., 1972]. Впервые реакция ДИД была поставлена на предметных стеклах, покрытых слоем агара по гексагональной схеме, при которой вокруг центральной лунки, содержащей известный очищенный и концентрированный антиген, располагаются на равном расстоянии 6 лунок с…
Метод основан на способности антител формировать опалесцирующие зоны в геле, куда заранее внесены антигены вируса гриппа. Диффундирующей субстанцией являются антитела, тогда как антиген фиксирован в геле, в форме интактных вирусных частиц [Schild G. et al., 1972]. ОРИД выполняется на специальных герметизированных пластиковых предметных стеклах, покрытых агарозным или агаровым гелем, содержащим очищенные вирусные частицы в таком…
Эта реакция впервые была предложена для выявления противогриппозных антител G. Schild и соавт. (1975) и основана на способности эритроцитов, сенсибилизированных вирусными антигенами, лизироваться гомологичными антителами в присутствии комплемента. Реакцию проводят в агаровом геле, что позволяет точно измерять интенсивность гемолиза, которая пропорциональна уровню антител в исследуемых сыворотках. Одним из основных факторов, влияющих на чувствительность и специфичность…
Иммунофлюоресцентный метод (ИФ). Является в настоящее время основным приемом экспресс-диагностики гриппа, позволяющим обнаружить и идентифицировать возбудителя непосредственно в зараженных клетках, полученных из дыхательных путей больного человека. Сущность иммунофлюоресцентного метода состоит в формировании специфических комплексов между флюоресцирующими антителами и гомологичным антигеном, распознаваемым в люминесцентном микроскопе, где источником света являются УФ-лучи. Для этого используют антитела, конъюгированные флюоресцеина…
Иммунопероксидазный метод (ИПМ). Основан на обработке испытуемых материалов от больных антителами, меченными пероксидазой, которую выявляют с помощью цветной гистохимической реакции [Dobardzich R. et al., 1973]. Авторы для выявления гриппозного антигена в тканевых культурах использовали очищенные антитела к вирусу гриппа A/Aichi/68, коньюгированные при помощи глютаральдегида с пероксидазой. Клетки куриных эмбриональных почек (КЭП), обработанные меченными пероксидазой антителами,…
Высокоперспективным по нашим и литературным данным, оказался новый метод экспресс-диагностики гриппа, основанный на использовании Staphylococcus aureus группы А (штамм Cowan 1), сенсибилизированный антителами [Zalan E., Wilson С, 1976, 1978]. Принцип метода основан на способности гамма-глобулинов и связанных с ними антител интенсивно адсорбироваться на поверхности золотистого стафилококка. Антитела своим Fab фрагментом прочно соединяются с белком А…
Частота положительных диагнозов гриппа по данным серологических методов зависит от следующих основных факторов [Смородинцев А. А. и Коровин А. А., 1961]: интенсивности заболеваемости населения гриппом; точности выявления заболеваний по данным клинической диагностики; точности применяемых методов лабораторного исследования; антигенной структуры используемых для диагностики штаммов вируса, что особенно важно для постановки реакции торможения гемагглютинации; возраста обследуемых больных….
